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人胚胎干细胞|人的细胞

人胚胎干细胞|人的细胞

简要描述:人胚胎干细胞|人的细胞,细胞状态良好・*,保证活性・青旗生物有完的细胞库管理体系・公司提供ATCC细胞、原代细胞、传代细胞、正常细胞、耐药细胞、人细胞、大鼠细胞、小鼠细胞、猪细胞、兔细胞等细胞产品,
特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如

更新时间:2022-07-19

厂商性质:生产厂家

访问次数:384

详细说明:

感恩回馈,价格实惠,物美价廉,量大从优,部分产品赠送。。。。。。

 

 上海青旗生物科技有限公司是一批由美国留学归来的致力于服务中国生物领域的青年创办的一家新型公司。公司自创办以来,以优质的产品、快捷的速度和完善的售后服务,赢得生物界老师的厚爱,您选择青旗的理由: 产品齐全:囊括实验室仪器、设备、实验室耗材、免疫生物学试剂、动物生物学试剂、植物生物学试剂、微生物学试剂、细胞生物学试剂、遗传学生物试剂、生物化学试剂、分子生物学试剂。 品牌齐全:囊括国内外100多个知名品牌。 方便、快捷订货周期短,选择服务质量好的快递,全称跟踪,及时到达您的手中。青旗生物努力打造生物领域内的京东商城。 平价:同等质量的产品,我们这里价格实惠,为您节省每一分钱。 优质的售后服务:实验过程,我们有技术全程跟踪指导,若有问题,我们*时间为您处理,保证您售后无忧。 多姿多彩的技术服务:免疫学技术服务、Western Blotting技术服务、实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务、病理学检测技术服务等。 总之,青旗生物是您值得信赖的地方:诚实正直,以客户的切身利益为出发点,关注客户,协助客户一起成长!

 

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细胞名称人胚胎干细胞|人的细胞

培养基和添加剂
D-MEM/F-12培养基(GIBCO,货号12400024,添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)及0.005 mg/ml 胰岛素,90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
 
供应限制 
A。仅供研究之用。 

运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

人胚胎干细胞一般培养方法:

1、组织块培养法

A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。

B)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种2030小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。

C)培养24小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防RL95-2人子宫内膜癌细胞由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养35天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。

2、消化培养法

该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。

3、悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

细胞其它细胞株列表:

YBC3379 人肾癌细胞 A498-EGFP-puro    
YBC3380 小鼠成纤维细胞 L929-EGFP-puro    
YBC3381 人胃癌细胞 BGC-823-EGFP-puro    
YBC3382 小鼠肝癌细胞 Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)    
YBC3383 小鼠骨髓基质细胞 P9-EGFP-puro    
YBC3384 小鼠Lewis肺癌细胞 LLC-RFP-puro    
YBC3385 人胚肺成纤维细胞 MRC-5-EGFP+puro    
YBC3386 人骨肉瘤细胞 U-2 OS-EGFP+puro    
YBC3387  人肝癌细胞(高转移) MHCC-97H    
YBC3388 人肝癌细胞(低转移) MHCC-97L    

 

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

3收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联XI。

 

细胞用途:仅供科研使用。

细胞接受后的处理:

1 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h

3 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。

4 如果细胞长满(80%-90%)请及时进行细胞传代。

5 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联XI。

人胚胎干细胞|人的细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;添加0.01mg/ml胰岛素;双抗,1%

2 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

 

做细胞实验的同学看过来。原装ATCC细胞现货来啦。 

选择上海青旗生物细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

 

 

专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。

 

 

细胞培养常见问题及解决方法

问题

原因

解决方案

细胞生长缓慢

生长培养基使用不当

按照生产商的建议,使用相应的预热生长培养基。

生长培养基中血清质量差

使用其他批次血清。

传代操作不当

按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。

换液过于频繁

降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。

细胞传代次数过多

使用传代次数较少的健康细胞。

细胞生长超过汇合状态

哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行,建议细胞密度达 80-90%传代。

细胞被支原体污染

将细胞、培养基和试剂丢弃;新取一只冻存细胞,并且使用新的培养基和试剂。

细胞复苏存活率低

细胞冻存不当

新取一只冻存细胞,并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中,直至复苏。

自行制备的冻存细胞无活性

将细胞按照生产商推荐的密度冻存。

制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。

严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。

新取一只冻存细胞。

细胞复苏方法不当

严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。

确保冷冻细胞解冻迅速,接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

复苏培养基使用不当

使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。

细胞稀释过度

按照生产商的建议,将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果。

处理细胞时动作不够轻柔

冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。

冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光

如果未避光储存,冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质;新取一只冻存保护剂,重新冻存细胞。

 

 ★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料直接call,对您造成的不便还请见谅!
 ★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
       收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
最后,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。

 

 



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