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LoVo 人结肠癌细胞|LoVo 细胞

LoVo 人结肠癌细胞|LoVo 细胞

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更新时间:2022-07-19

厂商性质:生产厂家

访问次数:566

详细说明:

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 上海青旗生物科技有限公司是一批由美国留学归来的致力于服务中国生物领域的青年创办的一家新型公司。公司自创办以来,以优质的产品、快捷的速度和完善的售后服务,赢得生物界老师的厚爱,您选择青旗的理由: 产品齐全:囊括实验室仪器、设备、实验室耗材、免疫生物学试剂、动物生物学试剂、植物生物学试剂、微生物学试剂、细胞生物学试剂、遗传学生物试剂、生物化学试剂、分子生物学试剂。 品牌齐全:囊括国内外100多个知名品牌。 方便、快捷订货周期短,选择服务质量好的快递,全称跟踪,及时到达您的手中。青旗生物努力打造生物领域内的京东商城。 平价:同等质量的产品,我们这里价格实惠,为您节省每一分钱。 优质的售后服务:实验过程,我们有技术全程跟踪指导,若有问题,我们*时间为您处理,保证您售后无忧。 多姿多彩的技术服务:免疫学技术服务、Western Blotting技术服务、实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务、病理学检测技术服务等。 总之,青旗生物是您值得信赖的地方:诚实正直,以客户的切身利益为出发点,关注客户,协助客户一起成长!

 

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细胞名称LoVo 人结肠癌细胞|LoVo 细胞

复苏
1.37°C水浴预热培养基(DMEM+10% FBS);
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

细胞培养,大致的步骤是这样:

1.胚胎或者一些刚出生的人的器官或者组织上取得细胞,配制成细胞悬浮液.把细胞液放到培养瓶中,在培养箱里培养--------原代培养.

但是,不要以为这样就能一直无限培养下去.

因为LoVo 人结肠癌细胞|LoVo 细胞 在那个瓶壁上生长的时候,如果大量增殖,细胞之间会彼此相碰,细胞细胞就会停止分裂增殖,出现一种接触抑制.

2.我们为了它们能继续增殖,就用胰蛋白酶再把它们分开,然后再配制成细胞悬浮液,分开装到好几个瓶子里继续培养--------传代培养.


细胞传代
1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;
2.37°C水浴预热培养基(DMEM+10% FBS);
3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞;
4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基(DMEM+10% FBS)终止消化;
5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min;
7.弃上清,加入15-20ml的培养基(含血清)重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养。

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选择上海青旗生物LoVo 人结肠癌细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

 

 

专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。

 

细胞注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即咨询我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以咨询技术售后服务

格: 48T/96T

 Thymosin α1  规格: 48T/96T 人胸腺肽α1 
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 TP  规格: 48T/96T 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 
 TSLP  规格: 48T/96T 人胸腺基质淋巴细胞生成素 

 

细胞培养常见问题及解决方法

问题

原因

解决方案

细胞生长缓慢

生长培养基使用不当

按照生产商的建议,使用相应的预热生长培养基。

生长培养基中血清质量差

使用其他批次血清。

传代操作不当

按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。

换液过于频繁

降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。

细胞传代次数过多

使用传代次数较少的健康细胞。

细胞生长超过汇合状态

哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行,建议细胞密度达 80-90%传代。

细胞被支原体污染

将细胞、培养基和试剂丢弃;新取一只冻存细胞,并且使用新的培养基和试剂。

细胞复苏存活率低

细胞冻存不当

新取一只冻存细胞,并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中,直至复苏。

自行制备的冻存细胞无活性

将细胞按照生产商推荐的密度冻存。

制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。

严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。

新取一只冻存细胞。

细胞复苏方法不当

严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。

确保冷冻细胞解冻迅速,接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

复苏培养基使用不当

使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。

细胞稀释过度

按照生产商的建议,将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果。

处理细胞时动作不够轻柔

冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。

冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光

如果未避光储存,冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质;新取一只冻存保护剂,重新冻存细胞。

 

 ★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料直接call,对您造成的不便还请见谅!
 ★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
       收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
最后,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。

 



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