HCCC-9810人胆管细胞型肝癌细胞|HCCC-9810

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更新时间：2022-07-19

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HCCC-9810人胆管细胞型肝癌细胞|HCCC-9810   接受后处理

细胞冷冻及保存方法：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；

（2）HBL-100    人整合SV40基因的乳腺上皮细胞存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。

HBL-100    人整合SV40基因的乳腺上皮细胞培养方法如下：

1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，每孔1ml。

2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。

3、每隔3天跟换1次培养液，保持G418浓度不变。

4、选择出在10~14天内使HBL-100    人整合SV40基因的乳腺上皮细胞全部死亡的最低G418浓度来进行下一步的筛选试验。由于每种细胞对G418的敏感性不同，一般变动在100ug/ml～1000ug/ml范围。

HBL-100    人整合SV40基因的乳腺上皮细胞来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。

HCCC-9810人胆管细胞型肝癌细胞|HCCC-9810  培养操作

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
   
     1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

     4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

    1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

    3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

 ★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
 ★注：如运输过程中导致细胞污染或者死亡，我们将无条件补发
       收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
最后，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。

786-OKL0585人肾透明细胞腺癌细胞,786-O细胞

Caki-2KL0586人肾透明细胞癌细胞,Caki-2细胞

ACHN KL0587人肾透明细胞癌细胞,ACHN细胞

Caki-1KL0588人肾透明细胞癌皮肤转移细胞,Caki-1细胞

Caki-1KL0589人肾透明细胞癌 Caki-1细胞

NCI-H205KL0590人肾上腺腺瘤细胞,NCI-H205细胞

CASC123KL0591人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS细胞,KP-N-NS

SW-13KL0592人肾上腺皮质小细胞癌细胞,SW-13细胞

NCI-H295RKL0593人肾上腺皮质腺癌细胞,NCI-H295R细胞

GESKL0594人肾上皮细胞,GES细胞

SKRC39KL0595人肾乳头状细胞癌细胞,SKRC39细胞

HK-2KL0596人肾皮质近曲小管上皮细胞,HK-2细胞

CASC228KL0597人肾母细胞瘤细胞,SK-NEP-1细胞,SK-NEP-1

769-PKL0598人肾癌细胞系(769-P) 769-P细胞

ACHNKL0599人肾癌细胞系 ACHN细胞

A498KL0600人肾癌细胞系 A498细胞

SK-RC-42KL0601人肾癌细胞,SK-RC-42细胞

OS-RC-2KL0602人肾癌细胞,OS-RC-2细胞

Ketr-3  KL0603人肾癌细胞,Ketr-3细胞

KCKL0604人肾癌细胞,KC细胞

GRC-1KL0605人肾癌细胞,GRC-1细胞

LGZC158KL0606人肾癌细胞,A498细胞,A498

A498-EGFP-puroKL0607人肾癌细胞,A498-EGFP-puro细胞

G401KL0608人肾癌Wilms细胞,G401细胞

SK-N-SHKL0609人神经上皮瘤细胞,SK-N-SH细胞

SK-N-MCKL0610人神经上皮瘤细胞,SK-N-MC细胞

SH-SY5YKL0611人神经上皮瘤细胞,SH-SY5Y细胞

SH-SY5YKL0612人神经母细胞瘤细胞株 SH-SY5Y细胞

SK-N-SHKL0613人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞

SK-N-BE(2)KL0614人神经母细胞瘤细胞,SK-N-BE(2)细胞

SH-SY5YKL0615人神经母细胞瘤细胞,SH-SY5Y细胞

M，BE(2)-M17KL0616人神经母细胞瘤细胞,M，BE(2)-M17细胞

CASC114KL0617人神经母细胞瘤细胞,IMR-32细胞,IMR-32