Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞|动物

简要描述：产品名称：Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞|动物
中国小鼠动物细胞，复苏及冻存细胞，国外及国产细胞，我们提供安全运输，低价、*、省心价供应，公司已打造国内细胞航母的技术服务，公司给广大客户培养细胞，成功率很高。

更新时间：2022-07-19

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产品名称：Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞|动物

• 细胞数量： 1*10^6
• 细胞种属： 小鼠源
• 生长特性： 贴壁
• 培养基： DMEM-H
• 形态特征： 成纤维细胞样
• 传代方法： 1:3传代,2-3天传一代
• 培养条件： 胎牛血清至最终浓度为10％。环境：空气，95％;二氧化碳（CO2），5％；温度，37℃
• 细胞描述： 亲本L的亚克隆，是最早建立的连续传代细胞之一，L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+，HPRT+。
• 细胞冻存： 液氮冻存（冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO）
• 细胞运输： 干冰运输（2ml冻存管）或活细胞运输（T25瓶）

Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞|动物

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细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件：基础培养基 +10% FBS；37℃，5% CO2
传代方法：建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件：90%FBS+10%DMSO
 
1.为什么培养的细胞要及时传代？
    答：体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。
2.培养液pH下降很快可能原因有哪些？其解决办法是什么？
    答：通常细胞生长得非常快时，pH值通常下降得很快。此时可以及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外，培养瓶盖拧得太紧、NaHCO3 缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或真菌污染等也能导致pH值通常下降得很快。
       (1)按培养液中NaHCO3 浓度增加或减少培养箱内CO2 浓度，2.0g/L 到3.7g/L 浓度NaHCO3对应CO2浓度为5％到10％。
       (2)改用不依赖CO2培养液。
       (3)松开瓶盖1/4 圈。加HEPES 缓冲液至10 到25mM终浓度。
       (4)在CO2 培养环境中改用基于Earle′s 盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks 盐配制的培养液。
       (5)如果是污染造成的则丢弃培养物或用抗生素除菌。
3.培养液pH对细胞生长的影响？
    答：由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时，需要注意一点：培新配的培养基在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？
    答：研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。但对于DMSO敏感的细胞，还是复苏细胞时，用离心去除DMSO比较好。
5.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？
    答：研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浮细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于–80 ℃太久等。建议严格参照ATCC或ECACC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。
6.支原体污染会对细胞培养有何影响？
    答：支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数、代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义。
7.冷冻保存细胞之方法？
    答：冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃(30－60 分钟)→-20℃( 30 分钟) → -80℃(16－18 小时或隔夜)→ 液氮罐长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80 ℃以下， 再放入液氮中长期储存。注意：-20℃不可超过1 小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
 
8.悬浮细胞应如何继代处理？
    答：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养瓶中，稀释细胞浓度即可。若培养液太多时可分瓶取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养瓶中，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。
9.欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？
    答：欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g (约1,000rpm)，5 - 10 分钟，过高之转速过长时间都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心决定。 RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中 r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative eentrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示表示单位。
10.培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响？
    答：一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。
11.细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？
    答：除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞)，在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养方瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
12.冷冻管应如何解冻？
    答：取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1－2 分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75％消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。

13、如何用台盼兰计数活细胞？

    答：将样品适当稀释后，用稀释后的样品和0.4％的台盼兰溶液按1:1混合后，用移液枪点样到血球计数板，置于倒置显微镜下观察、计数，其中蓝色细胞是死细胞，因活细胞排斥台盼兰，不被染色。
14.细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？
    答：冷冻管内细胞数目一般为1-8×106 cells/ml vial。
 

小鼠细胞美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上zui大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向全球发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
Bordet-GengouAgarMedium

MacConkey Agar incubation media MacConkey Agar

肠膜明串珠菌 产生右旋糖酐，做临床输液用 支/瓶

BoltonBroth

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肉汤培养基250g用于初次分离细菌的增菌培养

糖发酵基础肉汤 Bromcresol Purple Broth Base 适用于微生物检验中各种糖发酵实验，无菌加入各种糖醇类物质(SN标准)

SCHAEDLER厌氧菌琼脂 SCHAEDLER Agar 250克 厌氧菌的分离培养

亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养，需添加亚碲酸钾及羊血incubationmedia亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养，需添加亚碲酸钾及羊血

EnterococcusBroth
小鼠环孢素A(CsA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒

humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

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植物同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二磷酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人细胞分裂周期基因(CDC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

猪骨形成蛋白2(BMP-2)免疫试剂盒 Pig Bone Morphogenetic Protein 2,BMP-2 ELISA Kit

Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISA试剂盒人苯丙酸诺龙/苯丙酸去甲睾同(NP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织总胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

HumanFreeTestoterone，F-TESTOELISAKit人游离睾同(F-TESTO)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠杂交瘤细胞；B6y H4说明书兔阿霉素(ADR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒

Humanai-typhusaibodyELISAKit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISA试剂盒人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T