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PBS和D-PBS缓冲溶液的配制方法

发布时间:2022-03-04 点击量:762

磷酸盐缓冲液(简称PBS)的是生物化学中常用的一种阻碍溶液pH变化的缓冲溶液,这种由盐溶液中含有氯化钠,磷酸盐,磷酸盐,氯化jia和磷酸钾组成。组份浓度:137 mM 氯化钠,2.7 mM 氯化jia,10 mM 磷酸二氢钠,2 mM 磷酸二氢钾。本文总结了PBS和D-PBS溶液的配制方法。

1. 常规PBS磷酸盐缓冲液
组成成份:
磷酸二氢钾 34 g
1 mol/L氢氧化钠溶液 175 ml
蒸馏水 825 ml
PH 7.2

配制:
先将磷酸盐溶解于500 mL蒸馏水中,用1 mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000 mL。
稀释液:
取储存液1.25 mL,用蒸馏水稀释至1000 mL。分装每瓶100 mL或每管10 mL,121 ℃高压灭菌15 min。
用途:主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值,以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工,如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

2. PBS Buffer的配制具体步骤
组份浓度:
137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
配制量:1 L

配制方法:
(1)称量下列试剂,置于1 L烧杯中。
NaCl 8 g
KCl 0.2 g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27 g

(2)向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
(3)滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
(4)高温高压灭菌后,室温保存。

注意:
上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

3. D-PBS是杜氏磷酸缓冲液
全称为:Dulbecco's Phosphate Buffered Saline
组分 分子量 浓度 (gm/L) 摩尔浓度 (mM)
氯化jia (KCl) 75 0.20 2.67
磷酸二氢钾 (KH2PO4) 136 0.20 1.47
氯化钠 (NaCl) 58 8.00 138.00
磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10
pH值为7.4。

(1)杜氏磷酸盐缓冲液(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline,D-PBS)也是一种磷酸盐缓冲液,与常规PBS的不同之处在于磷酸盐的含量稍低些,并含有钙镁离子。D-PBS主要用于胚胎学方面的研究,多用于胚胎的冲洗液、冻存液和培养液。
(2)D-PBS配方:氯化钠8 g,氯化jia0.2 g,磷酸氢二钠1.15 g,磷酸二氢钾0.2 g,氯化钙0.1 g,含6个结晶水的氯化镁0.1 g溶于1 L ddH2O中。
(3)以上配方为含有钙镁离子的D-PBS,如不加氯化钙和氯化镁,即为无钙镁的D-PBS。
(4)在以上配方的基础上,还可以加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以更利于培养物的生长。
D-PBS是杜氏磷酸缓冲液,也是一种磷酸盐缓冲液,与常规磷酸缓冲液最大的不同点在于磷酸盐的含量稍低些,根据是否含钙镁分为两种即D-PBS w/钙 & 镁和D-PBS w/o 钙