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如何选择合适的缓冲液

发布时间:2022-01-21 点击量:1281

缓冲液在实验中的作用十分强大,由上于缓冲液的类别非常多,所以我们常会看到某某缓冲液的配制方法有哪些或者是一些使用方法等,但其他在选择上,也是十分重要,其作用主要是缓冲作用,而这种作用的前提是基于溶液,固有的时候也会被称为:缓冲溶液!

缓冲液的品种非常多,比如常见的有HEPES缓冲液,磷酸盐缓冲液,Tris缓冲液,甘氨酸缓冲液,虽然我们都知道这些缓冲液有很多的优点,但同时也有着不可避免的缺点;本文将为您一一进行揭晓,我们只有把这些问题弄清楚了,才可以更加清楚的去选择适合的缓冲液。

如何选择缓冲液, 缓冲液有什么优点及缺点

一般来说,在选择缓冲液时,我们需要遵循以下几个要求,特别是需要确定该缓冲液所需的PH值,具体如何选择请参考下面说明:

选择缓冲体系,其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内,因为缓冲液的pKa变化超过一个pH单位时,其缓冲能力就会明显下降;

缓冲体系不应影响蛋白质的活性或者DNA的稳定性,并避免其他离子的干扰;

最后,还要考虑温度的影响:温度不仅对缓冲液有影响,对细胞也有影响,大多数动物细胞在37℃的生理状况下pH为7.0~7.5,而在温度下降到0℃时可达到8.0。


那么缓冲液有什么优点及缺点有哪些呢?由于缓冲液的品种特别多,所以我们拿出几个系列的产品作详细讲述!
 

磷酸盐缓冲液的优点及缺点:

磷酸盐缓冲液是使用广泛的一种缓冲剂,由于它有二级解离,所以缓冲的pH值范围很广,可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液。

A、优点

易配成各种浓度

适用pH范围宽

pH受温度影响小

稀释后pH变化小

B、缺点

易与常见的钙离子、镁离子及重金属离子缔合成沉淀

Tris缓冲液的优点及缺点

Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围。

A、优点

碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的但范围pH缓冲液;

对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

B、缺点

pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1

温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4

易吸收空气中的二氧化碳

HEPES缓冲液的优点及缺点

HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。

A、优点

在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值,并对细胞无毒性作用。

B、缺点

在高浓度时对一些细胞可能有毒,与其他缓冲剂相比价格略贵。