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血清是一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已为人所知,但还有一部分尚不清楚,而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
1.蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白,球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞附着;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着;转铁蛋白能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用。
2.多肽:血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员,是主要的促细胞增殖因子;成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,血清中含量虽很少,但对细胞生长也有一定作用。
3.激素:激素对细胞的作用是多方面的。胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关。类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用。促生长激素:促细胞增殖效应。
4.其他成本:氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
由于胎牛从未接触过外界, 与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。本文缔一生物为您具体分析胎牛血清在细胞培养中的作用。
1. 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。
3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5. 起酸碱度缓冲液作用。
6. 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
7. 参与细胞冻存。
在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定浓度。
胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保zheng血清优良品质。
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