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免疫实验的可靠性分析

发布时间:2017-12-01 点击量:1736

一 实验的稳定性

基本概念 

  实验的稳定性主要是是对实验的重复性的优劣进行考察,通常采用变异系数进行定量分析。

测定方法

  对一份标本进行多次检测,求出均值(X)和标准差(S),进而将两者相比求出变异系数(CV)。

CV=

S

 

X

注意事项

1.某一方法的CV值与测定次数有很大关系,一般n>20后CV值趋于恒定,才宜做为恒量方法的可靠性的指标。

2.如果某项实验,实验组与对照组标本同时检测则采用批内CV值评价可靠性即可。即在同一时间测定一份标本20次。如果实验需在一段时间完成,即不能一次实验完成则应采用批间CV值评价可靠性即隔一段时间反复测定一份标本。如果实验需在不同实验室完成,则应采取室间CV值,即将一份标本分发到不同实验室进行反复测定。

3.免疫学实验很多是靠目测判定结果(如凝集效价等)。有较强的主观干扰和个人判定差异,故在评价实验可靠性时必须考虑实验者的差异。即同一份标本宜由不同操作者判定,统计CV值。

4.免疫学实验CV值宜控制在10%以内,>10%不宜采取计量分析。>20%则应将计量资料转变成为计数资料,一般而论免疫学实验稳定性不很理想,做为折中方法免疫学实验多采用不连续等级资料进行定量(如效价等),做这类资料CV值>10%时也应转变成为阴性或阳的计数资料,这样做虽然会损失一部分信息,但实验的可靠性则提高了,因为同时也很大程度去除了错误的信息。CV>50%时计数分析也不宜采用,即该项实验无使用价值。

5.做平行样可以提高实验的稳定性,但要注意的是:做双平行样时两个数据相差>20%时应将这个标本删除,而不宜简单地取均值。做三平行样时宜采用中位数为观察值,如果中位数与相邻数差仍>30%也应将该标本数据删除。经验表明做平行样虽然可以大幅度提高实验的稳定性,降低标准差,减小CV值,但效率也随之降低。实际效果并不一定优于计数资料,但该方法对于标本来源困难的实验还是有意义的,必要时可以采取5平行对照,以减少样本损失。

二 实验的特异性

基本概念 

  考虑标本中的某些物质可能会对某项实验结果造成干扰,故宜对实验的特异性做出判断,即实验的抗干扰性能。此为考察实验可靠性的重要的指标。

测定方法

  以可能造成干扰的物质进行分组,如欲判定溶血对实验的影响,可采取溶血标本组和正常组进行分析;欲分析类风湿因子对实验的影响,可采用RF阳性组和RF阴性组进行分析。用实验同时测定已选定的两组标本,分析检测结果,理论上两组结果应相等则可判定实验结果不受干扰物质的干扰,实际使用中,两者结果的值之差之小于30%,统计学检验应无显著差异即可认为实验有可以接受的特异性。

注意事项

1.       一般以血清为标本的实验应对溶血,乳糜血标本对实验的影响作出判定,酶联免疫反应类的实验应对标本中RF对实验的影响做出判定。

2. 实验标本每组应不少于20例,否则无意义。

参考文献

1. 冯仁丰 刘永良 1990. 临床实验室建设与管理 上海:上海科学技术出版社 195-202

                      (刘辉 刘启贵)

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