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Gibco胎牛血清灭活的相关问答

发布时间:2017-10-28 点击量:846
   Gibco胎牛血清灭活的相关问答
  Gibco胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且Gibco胎牛血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。Gibco胎牛血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。Gibco胎牛血清主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。Gibco胎牛血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对Gibco胎牛血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:
  一、Gibco胎牛血清灭活问题。
  1、问:加到培养基中的Gibco胎牛血清必须灭活吗?
  答:不是必须的,看做什么实验了。
  2、问:Gibco胎牛血清灭活是56℃30分钟吗?
  答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,Gibco胎牛血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存Gibco胎牛血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。
  3、问:我要做滋养细胞培养,Gibco胎牛血清要灭活吗?
  答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,还是灭活一下再用较安全。
  4、问:我用病毒上清转染细胞,培养用的Gibco胎牛血清需要灭活吗?因为Gibco胎牛血清中可能有些补体和抗体,是不是会影响转染?我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合,影响转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞,病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?
  答:Gibco胎牛血清一定要灭活,可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主结合过程的干扰,一般是2-6小时,根据细胞的状态决定。Gibco胎牛血清不一定需要灭活,灭活的目的是将血清中的补体灭活!这要根据实际情况而定,如果没有把握那就灭活吧,也不麻烦56度半个小时。