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细胞株的冻存方式

发布时间:2017-07-12 点击量:1298
   细胞株的冻存方式
  细胞株被定义为经原代培养的组织细胞,培养到第10代左右,度过*次死亡危机后的细胞群,这种细胞的遗传物质没有发生改变;细胞系则被定义为可以度过第二次死亡危机,传代培养到40~50代的细胞,这部分细胞的遗传物质发生了部分改变并且细胞带有癌变的特点,这种细胞在适宜条件下无限传代。
  细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。
  细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲,可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
  细胞株的冻存与复苏:
  一、细胞株的冻存:为避免污染造成的损失,zui小化连续细胞株的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞株前,细胞株应该特性化并检查是否污染。
  有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:
  ◆包含10%甘油的*培养基。
  ◆包含10%二甲基亚砜(DMSO)的*培养基。
  ◆50%细胞株条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基。
  ◆50%细胞株条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。