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无血清培养基是未来细胞培养领域的一种趋势

发布时间:2017-07-11 点击量:887
   经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基成为未来细胞培养领域的一种趋势。采用无血清培养基可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。

  无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质的能力;或者要大规模的培养某种细胞,以获得它们的分泌产物。因此研制出无血清培养基一直是生物科学工作者努力的目标。

  无血清培养基的优点

  ●增加确定性

  ●性能更加一致

  ●容易进行纯化和下游加工

  ●细胞功能的评估

  ●增强生长和/或产量

  ●增强细胞内中介物的检测

  ●生理反应性的较好对照

  无血清培养基专门用来在无血清条件下培养特殊类型的细胞或进行特殊应用。无血清培养基的使用展现了一种重要的培养方法:允许细胞培养在一套限定条件下进行,尽可能避免受到干扰参数的影响。某些应用可能需要添加生长因子和/或细胞因子。

  无血清培养基无需添加血清,但可能含有离散的蛋白或大块蛋白片段。无蛋白培养基—无蛋白培养基不含有蛋白质,但可能含有植物或酵母的水解产物。很多无蛋白培养基都不含动物来源成分。符合化学定义的培养基—符合化学定义的培养基不含蛋白质、水解产物或其它未知成分。这些培养基不含动物来源成分,并且所有成分都有已知的化学结构。

  无血清培养基的使用方法

  目前,血清仍是动物细胞培养中zui基本的的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。

  细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的。细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化。

  为了使细胞适应无血清培养,关键的是使所培养细胞:

  ●处于对数生长中期  ●>90% 活细胞率  ●适应时以较高的起始细胞接种

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